cDNA在反转录界一直大名鼎鼎，但TA鲜少抛头露面！那我们怎样才能辨别出TA的身份呢？按理来说，RNA的质量没问题（28s和18srRNA清晰、明显，亮度比符合2:1），那么反转录产生的cDNA一般是不会出现问题的。但是偏偏有那么些个博学多才、才高八斗的抖机灵们想要一探究竟！
终于，作为2G冲浪选手，小编我也机灵了一回（上辈子积德）。
和小编一起来听听学霸们怎么说？
一号学霸
一般可以用电泳检测是否合成适当大小片段的条带，这方法看cDNA大小没问题（自信）；如果想看碱基那当然还是测序或者使用探针检测，就是比较麻烦（一如既往的自信）
二号学霸
三号学霸
用PCR检测合成的cDNA中管家基因的量，如果出现比较清晰的条带，基本可以证实你的cDNA没有问题，我们实验室一直这样控制（众人）。
如果不怕烦的话，可以在反转录第一链时加入少量同位素标记的dNTP，然后看一下放射比活度或做个放射自显影（别出心裁）。
四号学霸
五号学霸
首先看你用什么方法合成cDNA，如果随机引物合成，三号的建议可以考虑（因为管家基因片段多数较短）。如果是LDPCR，则这些内参可能无法检验结果的好坏（有条有理）。
dscDNA检测我倒是做过（LDPCR），理论上由总RNA起始的，哺乳动物应该1.2%浓度的琼脂糖凝胶于0.4～6kb有明显的smear，且有一些明显的亮带（脑、脾、胸腺除外）（过来人代表）。
六号学霸
七号学霸
做内参对照啊！如GAPDH，β-actin，β-MG等（言简意赅）。
.........（好多学霸，真好！）
这么多学霸出谋划策，你，懂了吗？
为了防止有人和小编一样可爱，英语、术语分不开，我先来解释一下：
Smear：小编查了是弥散带的意思
LDPCR：全称LongDitancePCR即长片段PCR
dscDNA：指依靠DNA聚合酶，与cDNA相互补的第二链cDNA
dNTP：脱氧核糖核苷三磷酸
那小编给大家做了总结，汇报如下，请各位霸霸查收～
选择试剂盒：您做反转录实验想得到什么样的产物呢？
产品试用福利
StarScriptIIcDNA第一链合成预混试剂
如何检测第一链cDNA合成成功？
（一）cDNA电泳检测（大多数学霸推荐，简单快速，但需注意特殊情况）
取约5ul反应产物，在1%琼脂糖凝胶上电泳，EB染色，紫外成像检测，呈现出大小在200～10Kb的条带，其中重心区域在1～4Kb之间，这说明反转录完全，得到了高质量的cDNA（如果RNA丰度低，电泳也可能是无产物，但是这种情况不代表PCR会无结果）。
（二）cDNA测序（受限较多，但结果精准）
全长双链cDNA做分子克隆实验，然后通过测序结果精确判断。
1）Oligo（dT）18和RandomPrimers按比例使用可解决poly（A）mRNA模板限制和长度限制的问题
2）序列特异性引物可获得目的序列
（三）探针检测（相对较麻烦，但结果较精准）
qPCR或RT-qPCR步骤
（四）管家基因/内参基因（引物类型限制，适用范围受限）
以反转录产物为模板，扩增内参基因，扩增有结果，说明cDNA的质量基本可以保证，这个方法限制于随机引物扩增（因为管家基因片段多数较短）。
而Oligo（dT）18与序列特异性引物扩增或做LDPCR（2kb、10kb等长片段）检测时，这些内参扩增的几率远大于全长或大片段cDNA的扩增，这时可能就无法通过内参来检验cDNA扩增结果的好坏。
（五）同位素标记
反转录中加入少部分同位素标记的dNTP，做放射比活度或放射自显影检测。